Кроме применения цоликлонов и стандартных сывороток определение группы крови (ГК) возможно при помощи стандартных эритроцитов https://sangvitest.ru/product/standartnye-eritrocity/. Для проведения такого исследования требуются образцы разделенной на фракции человеческой крови трех групп соответственно. Алгоритм действий такой же, как и при использовании стандартных сывороток.
Какие эритроциты используются для определения ГК
Чтобы получить реагент, забор крови производят у проверенных людей с разными группами крови – 0, А1, А2, В. Ее отбирают с учётом того, что для исследования подходят только образцы с высокой степенью агглютинации, которые взаимодействуют даже со слабой сывороткой в больших разведениях.
Никаких побочных реакций быть не должно, например, наклонности к гемолизу, панагглютинации. В некоторых случаях исходный материал может быть следующим:
- неразведённая кровь используется для проведения реакции по капельному способу и для уточнения титра сыворотки;
- эритроциты подгруппы A2 используют в целях проверки активности агглютина α;
- если исследование единичное, подходит капиллярная кровь из пальца (мочки уха);
- для некоторых исследований кровь получают путем более глубокого введения иглы или из вены.
После забора крови у реципиентов её центрифугируют, чтобы она разделилась на фракции. Сыворотку удаляют, оставшееся содержимое разводят физиологическим раствором и перемешивают. После этого ещё раз выполняется центрифугирование, жидкость удаляют, повторно вливают физраствор. Всю процедуру повторяют 3 раза, после чего отмывание считается завершенным. На последнем этапе добавляют консервант.
Алгоритм действий
Для проведения исследования в основном используют белую планшетку или тарелку, куда наносят маркировку групп, рядом с ними – серологическую формулу стандартных эритроцитов.
Затем выполняют следующее:
- Для проведения исследования используют венозную кровь, которая через полчаса после центрифугирования разделяется на фракции.
- Ячейки наполняют исследуемым материалом пациента – по одной капле примерным объемом 0.1 мл. Рядом наносят реагент в объеме по 0,01 мл – по одной небольшой капле.
- Капли перемешивают с использованием стеклянной палочки. Для каждой ячейки используется отдельный стерильный инструмент.
- После осторожно покачивают планшет в течение 3 минут для соединения жидкостей. Затем добавляют изотонический раствор хлорида натрия и визуально оценивают результат агглютинации. Добавление физраствора позволяет исключить возможность неспецифической реакции.
При расшифровке результатов учитывают эритроциты, принадлежащие крови группы I, как контрольные. Здесь отсутствуют антигены, поэтому они не способны вступать в реакции агглютинации ни с какими сыворотками.
Расшифровка результатов:
- агглютинация есть в ячейках II и III – ГК I;
- реакция наблюдается в стандартных эритроцитах III – ГК II;
- если агглютинация с II, то ГК III;
- при отсутствии реакции во всех ячейках ГК IV.
Методика определения ГК с использованием стандартных эритроцитов основана на том, что плазма одних людей может склеивать эритроциты крови других людей, вызывая реакцию изогемагглютинации. Появление в исследуемых образцах характерных сгустков, по которым и определяют ту или иную группу крови, возникает, если встречаются агглютинин в плазме обследуемого человека и агглютиноген, содержащийся в стандартных эритроцитах.